W jaki sposób kriokonserwacja zwiększa szanse na zapłodnienie?
Przy naturalnym nawożeniu sekret męskich gruczołów płciowych miesza się częściowo z komórkami naskórka, w wyniku czego zachodzi pewna zmiana pH podłoża, co prowadzi do zniszczenia osłonki lipoproteinowej plemników, tj. do ich aktywacji. Będąc w takim stanie, żywotność komórek rozrodczych jest poważnie ograniczona, co wyklucza ich dalsze wykorzystanie do zapłodnienia in vitro. Właśnie dlatego stosuje się metodę kriokonserwacji.
Technika ta znacznie wydłuża okres przydatności nasienia i umożliwia:
- zmniejszyć aktywność motoryczną plemników;
- zapewnia im dodatkowe źródło energii;
- chroni membrany komórek płciowych przed zniszczeniem;
- zapobiega gromadzeniu się toksycznych produktów przemiany materii;
- blokuje reprodukcję drobnoustrojów w ejakulacie.
Jakie środki są używane do przechowywania nasienia?
W celu ułatwienia, tak zwany proces miażdżenia ejakulatu niezbędny do izolacji z niego komórek rozrodczych, należy wstępnie rozcieńczyć nasienie. Stosuje się specjalne odczynniki.
Do tej pory zwykle używa się syntetycznych nośników do przechowywania nasienia, z których każdy wymaga specjalnych warunków. Zazwyczaj tego rodzaju środowisko składa się z kilku komponentów, zwykle co najmniej trzech. Tak więc, w ich strukturze możliwe jest przydzielanie cukru, najczęściej i są używane glukoza i laktoza, cytrynian sodu.
Jeśli mówimy o specyficznych związkach chemicznych, które można wykorzystać jako nośniki do przechowywania plemników, wówczas można je nazwać buforem Tris, Trilonem B, EDTA, Spermosanem PPK.
W jakich warunkach jest przechowywany ejakulat?
Technologia zamrażania i przechowywania nasienia wymaga przestrzegania specjalnego trybu chłodzenia, a także stosowania specjalnych urządzeń. W tym przypadku sama sala laboratoryjna musi być koniecznie wyposażona w urządzenia do sterylizacji powietrza.
Przed pobraniem ejakulatu wszystkie niezbędne urządzenia do kriokonserwacji, w szczególności wszystkie rodzaje kolb, cylindry miarowe, pipety, filtry papierowe są sterylizowane w specjalnej szafce w temperaturze 130-150 stopni. Przed bezpośrednią procedurą próbkowania są one umieszczane w specjalnym termostacie, który utrzymuje stałą temperaturę 37 stopni.
Po pobraniu próbki męskiego nasienia umieszcza się ją w sterylnej kolbie. Temperatura przechowywania nasienia powinna być stała. Proces chłodzenia odbywa się w 2 etapach.
Aby użyć ejakulatu, wcześniej zamrożonego, naczynie wraz z nim umieszcza się w ciepłej wodzie, gdzie następuje powolne rozmrażanie. Następnie, zużyte krioprotektanty są usuwane przez powtarzające się ponowne wytrącanie nasienia w wirówce. Następnie sam płyn nasienny zostaje zastąpiony pożywką, do której następnie umieszcza się plemniki.